原代细胞制备与培养操作方法 / 开普饭

久没到论坛来,看到以前有些朋友的提问,将自己培养小鼠骨髓间充质干细胞的经验与大家做一交流,望有所帮助. 一.细胞采集 1.小鼠周龄本人实验采用C57BL/6小鼠,雌雄不限.实验中发现按文献所述采用4 ...

③酶的浓度胰蛋白酶一般采用的浓度为0.1%-0.25%(活力1:200或1:250),但遇到难消化的组织时,浓度可适当提高,消化时间适当延长.浓度高对细胞有毒性,而较低浓度的胰蛋白酶在培养液中可促进 ...

原代细胞是出了名的难养,对培养环境和实验操作的要求更苛刻.原代细胞在体外通常只能传代少数几次,某些原代细胞(如神经元细胞)甚至无法进行传代.对于研究人员来说,如何才能经济高效地培养好原代细胞,并围绕这 ...

原代细胞分离常采用的方法有以下两种: 一.悬浮细胞的分离法 1.将血液.羊水.胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/min的低速离心5分钟: 2.去掉上清,离心沉淀用无钙.镁的PBS清洗后 ...

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密,不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖,即使采用1mm3的组织块,也只有少量处于周边的细胞可能生存和生长,若需获取大量细胞,将现有的组织块充分散开,使细胞解 ...

体外培养细胞在发育.组织维持与重塑.肿瘤发生机制.再生医学.新药开发等生命科学各研究领域中发挥了重要作用.原代细胞经过有限代数的增殖后通常会出现衰老死亡,因此生物学家需要不断地用组织重新进行原代培养以 ...

原代细胞(Primary cells)是指来源活体组织,经特定分离方法制备而成的初始细胞.原代细胞离体时间短且不经过永生化过程,其生物学特性未发生很大变化,仍保持原有的遗传特征,可更好地反映细胞在体内 ...

原代细胞生长缓慢,一般认为,原代细胞培养的第1代和传代到第10代以内统称为原代培养.原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了,细胞的生长会出现停滞,大部分细胞衰老死亡.但是有极少数的细胞能够度 ...

Cell type相对感染效率(2)Cell lines(human)HEK293embryonic kidney cells++++TE671rhabdomyosarcoma cells++++He ...

凡是来源于胚胎.组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞.人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密,不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖,必须将现有的组织块充分散开, ...

原代细胞制备与培养操作方法