siRNA转染的方法 / 开普饭

本实验室常用invitrogen的细胞转染试剂:Lipofectamine2000.转染前一天,胰酶消化细胞并计数,细胞铺板,使其在转染日密度为90%.细胞铺板在0.5ml含血清,不含抗生素的正常生长 ...

细胞转染:HEK 293T细胞是慢病毒包装生产及滴度测定,细胞转染,条件培养基制作,蛋白表达验证等试验所必须的工具细胞.HEK 293T细胞为人胚肾细胞: 细胞转染的目的粗略理解为使用阳离子聚合物+质 ...

siRNA合成的方法主要包括: 1.化学合成 2.体外转录 3.长片断dsRNA经RNaseIII类降解(如Dicer.E.coli.RNaseIII) 4.siRNA表达载体或者病毒载体在细胞中表达 ...

通常使用的转染方法主要有DNA-磷酸钙共沉淀法,电击法,脂质体法. 质粒DNA的基本元件外源基因是以质粒DNA的形式进入动物细胞的,同时质粒DNA上带有提高外源基因转录和翻译水平的元件.尽管病毒来源 ...

RNAi(左)和小分子抑制剂(右)抑制蛋白质活性的作用方式如图所示,RNAi中常用的siRNA和shRNA都是针对蛋白质表达前的mRNA进行靶向,进而调控蛋白质表达量,而小分子抑制剂则是靶向蛋白质- ...

2001年,Sprinzl等[29]开发了腺病毒载体携带1.3倍的鸭HBV基因组(Ad-DHBV),经尾静脉注射进入小鼠体内的方法.采用类似的方法,von Freyend等[30]将含有1.3倍HBV ...

细胞由带负电荷的磷脂双分子层构成,这对大分子物质来说是个不可透过的屏障,比如DNA和RNA的磷酸骨架,其也带负电荷.为了使核酸穿过细胞膜,研究人员开发了多种技术,大致分为三类:化学方法---利用载体分 ...

今天为大家推荐一个几年前的研究工作,没有给大家介绍过但是很重要.大家都知道,由于其生物相容性好等优点,外泌体这种天然的膜泡在药物尤其是大分子的递送方面具有很好的应用前景.但是天然外泌体的靶向性其实并不 ...

哺乳动物细胞瞬时转染能在短期内快速表达高活性蛋白而被广泛应用.本文主要介绍了细胞瞬时转染的步骤.原理,及血球计数板对细胞计数的原理和方法. 哺乳动物细胞自身具有蛋白折叠和翻译后修饰的功能,获得的蛋白更 ...

肋间神经痛肋间神经痛系指一个或几个肋间部位沿肋间神经分布区发生经常性疼痛,并有发作性加剧特征.原发性者较少见,继发性者多与邻近器官和组织的感染.外伤或异物压迫等有关.此外,髓外肿瘤和带状疱疹亦常为产 ...

siRNA转染的方法