点突变小鼠模型构建原理
某些疾病由单个碱基突变引起，通过突变小鼠的相应碱基可以模拟。CRISPR 打断 DNA 的同时，提供含有目的突变的单链修复模板，能够有效地建立点突变小鼠。影响点突变效率的主要因素是，该点突变附近有没有高效率切割 DNA 的 gRNA，如果有，是比较幸运的，如果没有，可以选取邻近的 gRNA，这可能造成二次切割，需要引入同义突变。在这里提醒大家，切割位点离突变位点越远，突变效率越低。
点突变小鼠制备示意图
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某些疾病由单个碱基突变引起，通过突变小鼠的相应碱基可以模拟。CRISPR 打断 DNA 的同时，提供含有目的突变的单链修复模板，能够有效地建立点突变小鼠。影响点突变效率的主要因素是，该点突变附近有没有高效率切割 DNA 的 gRNA，如果有，是比较幸运的，如果没有，可以选取邻近的 gRNA，这可能造成二次切割，需要引入同义突变。在这里提醒大家，切割位点离突变位点越远，突变效率越低。
点突变小鼠制备示意图