环状质粒型同源重组载体是什么？

环状质粒载体是实现大肠杆菌基因敲除的经典策略，依靠的是RecA重组系统。RecA系统主要包括RecA、RecBCD、RuvA、RuvB、RuvC等。RecA具有与重组相关的活性，RecBCD可降解线性DNA片段，通过Chi序列识别靶位点，形成单链区域，然后再RecFOR、RecQ、RuvABC、SSB等蛋白共同作用下由RecA进行同源重组。
应用此类载体进行的基因敲除可分为2种类型，一种是通过同源单交换的插入型敲除，另一种是通过同源双交换的置换型敲除，后者可实现目标基因无痕敲除，但是第二步的效率较低。