129Xe MRI/19F MRI光学成像显影剂/含硝基咪唑基的水溶性磁共振成像造影剂
129Xe MRI/19F MRI光学成像显影剂/含硝基咪唑基的水溶性磁共振成像造影剂
与现有技术相比，本文具有以下的明显有益效果：
(1)本文使用S75磷脂做膜材料，用胆固醇-PEG2000-RGD分子进行修饰，采用超声和振荡的方法制备纳米乳，其中F-68的添加可以使微乳结构更加稳定，材料便宜易得，制备方法简单并具有良好的生物相容性；
(2)本文制备的纳米乳同时作为129Xe MRI和19F MRI显影剂以及光学成像显影剂，是一种129Xe/19F双通道、双模态MRI显影剂；
(3)作为129Xe Hyper CEST显影剂，本文纳米乳具有超高的灵敏度高，可在皮摩尔浓度下对肺癌细胞进行MRI成像。通过129Xe MRI和19F MRI以及光学成像证明了该纳米乳对肺癌肿瘤具有较好的靶向性，该显影剂可以应用于肺癌肿瘤的早期MRI诊断。
具体实施方式
下面以具体实施例子，进一步阐述本文。下述实施例仅用于说明本文而不用于限制本文的范围。
实施例1
一种RGD-全氟化碳纳米乳MRI显影剂的制备方法，包括如下步骤：
(1)纳米乳的制备：先将40mg的磷脂Lipoid S75和5mg普朗尼克F-68溶解在1mL浓度为5mM、pH＝7.4的磷酸盐缓冲液中，然后将0.2g的全氟溴辛烷(PFOB)加入到上述缓冲液中，并在功率为170W超声仪中处理8分钟，再用试管振荡器振荡12分钟，得粗乳液；之后将制备的粗乳液用去离子水稀释20倍，再通过孔径为0.22μm的微孔滤膜挤制2次，得到纳米乳记为NPs；
(2)RGD-纳米乳的制备：将1.2mg的胆固醇-PEG2000-RGD加入到3mL步骤(1)制备的纳米乳液中，然后置于摇床上以300rpm的速度振荡1小时得到靶向纳米乳NPs-RGD；
(3)荧光标记的RGD纳米乳的制备：向3ml步骤(3)制备的靶向纳米乳中加入浓度为5mg/mL的荧光染料DiI，然后置于摇床上以300rpm的速度振荡1小时，得到DiI标记的RGD-纳米乳。
其中，所述胆固醇-PEG2000-RGD的制备方法为：将21.4mg胆固醇-PEG2000-Mal和5mg RGDyc加入1ml PBS中，室温下置于摇床上以300rpm的速度振荡20小时。然后用截留分子量为1000Da透析袋在超纯水中透析去除未反应的RGDyc分子，经冷冻干燥机冻干得到靶向分子胆固醇-PEG2000-RGD。
将本实施例1制备的NPs-RGD进行动态光散射检测，所得的动态光散射图如图1所示，平均水合粒径为195nm。
将本实施例1制备的NPs-RGD用透射电镜进行扫描，所得的透射电镜图如图2所示，图中可以看出，本实施例制备的NPs分散性好，粒径均一。表面有一层类似膜的结构，说明PFG-RGD分子修饰到纳米乳的表面。
将本实施例1制备的NPs-RGD进行紫外吸收检测，所得的紫外吸收光谱图如图3所示，在275nm处检测到RGD分子特征吸收峰，说明RGD分子成功修饰到纳米乳表面。
将本实施例1制备的NPs-RGD进行荧光发射光谱检测，从图4中可以看出较大发射波长为570nm。
将本实施例1制备的NPs-RGD进行氟谱检测，所得的氟谱如图5所示，PFOB的17个F显示出8组峰。
将本实施例1制备的NPs-RGD进行129Xe NMR谱检测，如图6所示，Xe在PFOB纳米乳中的信号在106ppm处，水溶液中的Xe信号在195ppm。
将本实施例1制备的NPs-RGD进行129Xe Hyper CEST谱检测，如图7所示，106ppm有一个较强的CEST信号，来自于Xe在PFOB纳米乳中的信号。
将本实施例1制备的NPs-RGD分别与正常细胞以及肿瘤细胞孵育之后测129Xe MRI谱图，如图8A所示，肿瘤细胞有较强的CEST信号，显示出很亮的信号。而正常细胞基本没有信号，说明了NPs-RGD对肿瘤细胞有特异性靶向作用。做19F MRI成像结果如图8B所示，肿瘤细胞有较强的19F信号，正常细胞没有信号，再次证明了NPs-RGD对肿瘤细胞的靶向性及MRI成像性质。
T1造影剂
Gd-DTPA
Gadolinium-LabeledAlbumin
Gadolinium-labeledIgG
Gadolinium-labeledProteinA
Gadolinium-labeledPolylysine
Gadolinium-labeledBSA
Gd-BSA-FITC
Gd-BSA-RhodamineB
Gd-DOTA
Gd-DO3A-Butylamine
DMPE-DTPA-Gd
DTPA-BSA-Gd
DPPE-DTPA-Gd
DSPE-DTPA-Gd
DMPE-DTPA-Gd-DMPE
DPPE-DTPA-Gd-DPPE
DSPE-DTPA-Gd-DSPE
MRI的T1造影剂
产品名称：Gd-DTPA/Gado-DTPA
产品全称：Gadolinium-DTPA
中文名称：二乙三胺五乙酸钆络合物/钆喷酸葡甲胺盐
产品名称：Gd-BSA
产品全称：Gadolinium-labeledbovinealbumin
中文名称：钆-牛血清白蛋白
产品名称：Gd-BSA-FITC
产品全称：Gadolinium-labeledbovinealbumin-Fluorescein
中文名称：钆-牛血清白蛋白-绿色荧光素
产品名称：Gd-BSA-RhodamineB
产品全称：Gadolinium-labeledbovinealbumin-RhodamineB
中文名称：钆-牛血清白蛋白-红色罗丹明
产品名称：Gd-IgG
产品全称：Gadolinium-labeledImmunoglobulinG(bovine),Gd-IgG
产品名称：Gd-ProteinA
产品全称：Gd-ProteinA, Gadolinium-ProteinA
中文名称：钆-蛋白A
产品名称：Gd3O4
产品全称：Gadoliniumoxidenanoparticles
中文名称：纳米钆氧化物
产品名称：PLL-Gd
产品全称：Gadolinium-Polylysine/Gadolinium-labeledpolylysine
中文名称：聚赖氨酸-钆
产品名称：Gd-DOTA
产品全称：Gadolinium-Gadolinium(III)1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetate
中文名称： 钆-大环配体
Gd-p-SCN-Bn-DOTA
产品名称：Gd-p-SCN-Bn-DOTA
中文名称： 钆-大环配体
产品名称：14:0PE-DTPA(Gd)，DMPE-DTPA-Gd
产品全称：1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-diethylenetriaminepentaaceticacid(gadoliniumsalt)
中文名称： 钆-大环配体-磷脂
产品名称：DTPA-BSA(Gd)，DTPA-BSA-Gadolinium
产品全称：DTPA-bis(stearylamide)(gadoliniumsalt)
中文名称： 钆-大环配体-牛血清白蛋白
T2型造影剂-超顺磁性四氧化三铁颗粒（USPIO/SPIO）
wyf 04.02