非定点基因整合技术原理
非定点基因整合概述
慢病毒 属于逆转录病毒科,名称源自该种病毒长达数年的潜伏期,其中最为人所知的是人类免疫缺陷I型病毒(HIV-1)。HIV-1直径约120nm,含两条正链RNA,可有效的进入细胞核中,对分裂期细胞及非分裂期细胞均具有很高的感染效率。慢病毒感染细胞后,其携带的外源基因能够整合到宿主细胞基因组中,伴随宿主细胞稳定遗传,从而实现基因在细胞中稳定持续表达,因此慢病毒成为外源基因导入的有效工具。
慢病毒(lentivirus)载体是基于HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)发展而来的基因治疗载体。作为逆转录病毒科的一种,慢病毒具有逆转录病毒的基本结构及特性:整合入宿主细胞基因组,长期表达,可用于转基因动物制备;同时慢病毒还表现出常规逆转录病毒不具备的优点:更高的滴度,感染非分裂期细胞的能力等。利用慢病毒载体,可以研究启动子的调控、过表达特定基因或沉默特定基因等。
非定点基因整合技术原理
慢病毒介导的非定点基因整合原理:含有目的基因的慢病毒颗粒感染宿主细胞后,目的基因经过反转录整合到宿主基因组,随着宿主基因组复制和转录。
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