磷酸钙共沉淀技术原理及步骤
原理:将DNA与氯化钙在磷酸缓冲盐水中混合形成磷酸钙-DNA沉淀物,然后将其分散在培养的细胞上,磷酸钙促进共沉淀物中的缩合DNA与细胞表面的结合,DNA通过内吞作用进入细胞。
实验步骤:将氯化钙和DNA混合,以可控的方式加入磷酸缓冲液。→在室温下孵育,以形成极细,可溶的共沉淀微粒→将磷酸钙-DNA沉淀物加入细胞中,后者能黏附到细胞膜表面→共沉淀物经细胞内吞作用进入细胞→检测基因表达或沉默情况。
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原理:将DNA与氯化钙在磷酸缓冲盐水中混合形成磷酸钙-DNA沉淀物,然后将其分散在培养的细胞上,磷酸钙促进共沉淀物中的缩合DNA与细胞表面的结合,DNA通过内吞作用进入细胞。
实验步骤:将氯化钙和DNA混合,以可控的方式加入磷酸缓冲液。→在室温下孵育,以形成极细,可溶的共沉淀微粒→将磷酸钙-DNA沉淀物加入细胞中,后者能黏附到细胞膜表面→共沉淀物经细胞内吞作用进入细胞→检测基因表达或沉默情况。