质粒构建的原理及步骤 / 开普饭

[进入正题] 前面提到的几个探究蛋白互作相关的实验,其实第一步都需要构建合适的质粒,那么就少不了设计靠谱的引物了. 通常来说,引物的设计需要遵守一些基本的原则.这些原则很细,很多,也很繁琐.但实际上对 ...

上周我们为大家讲解了二代测序的开山鼻祖,Roche公司的454测序技术. 这周,让我们来聊一聊,ABI公司的SOLiD测序技术. 历史 ABI公司的SOLiD测序技术最初是由哈佛大学 Church 研 ...

质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖核酸(DNA)分子.现在习惯上用来专指细菌.酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DNA分子.在基因工程中质粒 ...

载体构建过程: 1.引物设计 2.目的片段选取:RNA提取.RNA反转录.PCR扩增.PCR产物纯化 3.双酶切 4.连接:T4 DNA ligase连接或者同源重组连接(新贝生物:#B101.#B1 ...

外源 DNA 经 PCR 扩增后,用限制性内切酶分别切割载体和外源 DNA 片段,DNA 连接酶将二者进行连接,然后转入宿主细菌,通过筛选鉴定获得重组克隆.经过一系列的操作,「快递员」质粒就完成了呈递 ...

基因文库用途广泛,如用于人类及动植物基因组学研究,基因表达调控研究,分析.分离特定的基因片段等.文库已经越来越多地应用于研究领域,如高通量药物靶点筛选,蛋白质工程定向进化,基因疫苗.抗体改造,生物遗传 ...

cDNA文库,是指含一种生物体所有基因编码的cDNA分子的克隆群.以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cD ...

CRlSPR/Cas9技术是基因编辑历史上的又一里程碑.该技术通过gRNA指导Cas核酸酶对靶向基因进行特定DNA修饰.gRNA文库是药物筛选或靶向筛选特定通路的理想工具,gRNA文库的建立将在功能基 ...

分子定向进化模拟自然选择过程,改变原有蛋白的氨基酸序列,以期获得具有功能的突变蛋白.基因突变文库是DNA变体序列的组合,是基因合成.基因突变和定向进化研究相结合的产物.基因突变文库已经越来越多地应用于 ...

裸鼠肝癌模型构建:取对数生长期细胞消化后离心,定量的PBS缓冲液及培养基将细胞吹打成3个不同细胞浓度组.将裸小鼠分为6组,每组10只,将以PBS缓冲液混悬的细胞和以完全培养基混悬的细胞分别接种在小鼠左 ...

(1)荷瘤鼠动物模型构建方法:皮下成瘤模型:把肿瘤细胞接种到裸鼠的前肢腋下或背部皮下等位置,观察成瘤结果,是肿瘤成瘤研究中*常用的模型.裸鼠是具有一定缺陷的小鼠,利用这一特点可以将肿瘤细胞移植到裸鼠皮 ...

质粒构建的原理及步骤