gRNA文库构建技术原理 / 开普饭

点击加载图片技术人员用口吸管将上百颗小鼠的受精卵置于一滴工作液中.摄影朱丹阳想象一下,只需要打一针,就可以把"手术团队"输送进体内,是不是很妙?在西湖大学生命科学学院研究员马丽 ...

脱靶效应是阻碍基因编辑技术CRISPR应用的主要障碍之一.如果未能精准编辑目标基因,该技术可能会诱导包括易位在内的染色体重排,从而导致疾病.尽管已有一些技术可用于分析细胞中被脱靶效应影响的DNA,但这 ...

基因文库用途广泛,如用于人类及动植物基因组学研究,基因表达调控研究,分析.分离特定的基因片段等.文库已经越来越多地应用于研究领域,如高通量药物靶点筛选,蛋白质工程定向进化,基因疫苗.抗体改造,生物遗传 ...

cDNA文库,是指含一种生物体所有基因编码的cDNA分子的克隆群.以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cD ...

分子定向进化模拟自然选择过程,改变原有蛋白的氨基酸序列,以期获得具有功能的突变蛋白.基因突变文库是DNA变体序列的组合,是基因合成.基因突变和定向进化研究相结合的产物.基因突变文库已经越来越多地应用于 ...

慢病毒shRNA文库介导的基因筛选常规流程如下图1所示.首先,利用慢病毒shRNA文库转导靶细胞,并通过慢病毒载体上携带的筛选标记(例如药物选择或荧光标记)来筛选成功转导的阳性细胞.将阳性细胞分为对照 ...

gRNA慢病毒载体由慢病毒基因组序列和细菌质粒序列构成.细菌质粒序列含有一个Ampicillin抗性基因和一个高拷贝复制子pUCori.慢病毒基因组序列是从元件5'LTR开始,到元件3'LTR结束. ...

通过sgRNA引导Cas9核酸酶切割基因组目的序列导致DNA双链断裂(Double-strand breaks, DSB),同时以包含点突变的同源序列为模版,通过同源重组修复(Homology dir ...

慢病毒载体可以将外源基因或shRNA有效整合到宿主染色体上,从而达到持久表达目的序列的效果.慢病毒除了对肿瘤细胞.肝细胞.内皮细胞等具有很高的感染效率外,对于一些较难转染的细胞如神经元.干细胞等,也具 ...

CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) /Cas (CRISPR-associated) 是最近几年出现的 ...

circRNAs(Circular RNAs,环形RNA分子)是一类不具有5' 末端帽子和3' 末端poly(A)尾巴.并以共价键形成环形结构的非编码RNA分子.circRNA是区别于传统线性RNA的 ...

gRNA文库构建技术原理