什么时候需要构建稳转株?
需要构建稳转株的,有这些类型:
(1) 长期在目的细胞中研究基因功能;
(2) 部分蛋白半衰期极长,瞬时RNA只能干扰表达,无法去除已经表达的目的蛋白,想要实现更好的基因干扰效果;
(3) 想要实验更精准,筛选拷贝数适量的细胞进行实验研究;
(4) 需要用诱导表达系统的,主要是一些致死基因或者是需要时空表达的;
(5) 需要用细胞做动物实验的,比如裸鼠成瘤等。
以下实验就不需要构建稳定株:
(1) 希望迅速观察目的基因过表达或者干扰效果;
(2) 2-4天的瞬时表达已经可以达到具体的实验目的,比如检测两个外源转染的目的蛋白之间的相互作用;
(3) 细胞个体差异对实验结果有影响。
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