文峰聊科研：“指南针”—Exosome
小编曾多次聊过肿瘤细胞为了形成转移灶，派出一群“外泌体”将士，创造远领域微环境，接着肿瘤细胞定向转移。小伙伴们，难道不好奇：何种魔力让肿瘤细胞定向转移的？具体机制今天小编带小伙伴们进入，魔力指南针Exosome—导航细胞迁移动态世界吧！
分泌性溶酶体具有分泌(secretion)的功能，包括涉及小泡的生成(biogenesis)、转运(translocation)、栓系(tethering)、锚定(docking)、启动(priming)和融合(fusion)等一系列复杂而精密的事件，可参与小泡内容物分泌、质膜损伤修复、膜蛋白运输等过程。外泌体的形成过程与溶酶体形成过程具有一些相似性，是否影响溶酶体分泌的物质，也会影响外泌体分泌？
文章：
2015年发表在《NATURE COMMUNICATIONS》杂志，IF= 11.470，标题：“Directional cell movement through tissuesis controlled by exosome secretion”，即外泌体分泌调控组织间细胞定向运动。这篇paper活体成像揭示：外泌体或前溶酶体/溶酶体分泌是如何调控细胞运动，并阐述了自分泌exosome通过增强粘附组装，促进定向持续有效的细胞迁移。
思路：
看文章，首先确定研究对象，整篇文章围绕细胞迁移展开，自然是用什么细胞系？研究对象：HT1080是高转移性的人成纤维肉瘤细胞系,常用于肿瘤细胞增殖、迁移的研究。
1. 前溶酶体/溶酶体分泌是如何调控细胞运动？
1.1前溶酶体分泌是怎么调控HT1080 纤维肉瘤细胞的转移的呢？又是怎么验证具有调控转移的作用？
自然，得先查查是什么影响前溶酶体分泌，之前有研究报道，Rab27a蛋白调控胞膜多泡次级内体(MVE)锚定，而Synaptotagmin-7 (Syt7)：突触结合蛋白7，促进溶酶体之间的融合。这两种功能蛋白影响溶酶体分泌在细胞转移发挥重要的作用，利用shRNA进行干扰蛋白，构建HT1080Rab27aKD 、HT1080Syt7KD细胞株，分别将正常细胞HT1080Scrambled、HT1080Rab27aKD、HT1080Syt7KD细胞株进行异种种植，静脉注入鸡胚胎的绒毛膜尿囊膜，模型构建方法见（Figure1b）。
然后活体成像，简单直观地揭示：敲低模型比正常模型迁移细胞距肿瘤的距离短（见Figure1 c-d）、迁移细胞的数量少(Figure1 d、f)。
1.2前溶酶体分泌增加还是减少HT1080 纤维肉瘤细胞的转移的距离和速度？是短暂效果还是持久效果？
细胞迁移活体成像，敲低模型比正常模型迁移细胞距离短（见Figure2 a-c）、迁移速度降低 (Figure2 d),持久指数降低(Figure2e)，且敲低模型比正常模型突起数量多，与细胞迁移速度及迁移持久指数相反。
2.外泌体分泌是如何调控细胞运动？
2.1外泌体分泌能增强细胞迁移能力吗？什么分子会影响外泌体分泌？外泌体的里面什么物质会影响细胞转移？
前面研究表明，Rab27a蛋白和Synaptotagmin-7 (Syt7)蛋白会影响溶酶体分泌，是否同样这两种功能性蛋白会影响外泌体分泌？敲低细胞比正常细胞迁移细胞分泌的exosome量数量是大大减少的(见Figure4a)。Exosome承载什么货物(cargo)影响细胞转移？敲低细胞株分泌Exosome承载FN（纤维连接蛋白）货物表达量降低了(见Figure4b)。自分泌Exosome（承载FN-纤维连接蛋白会增强细胞的转移的速度(见Figure4g).
2.2外泌体到底是怎么影响迁移细胞粘附，从而细胞的转移的呢？
作者想是不是会影响细胞粘附形成过程，之前已证明外泌体与FN（纤维连接蛋白）结合，拯救了Rab27a-KD细胞运动缺陷，设想用FN（纤维连接蛋白）培养基培养HT1080Rab27aKD，缺陷细胞的细胞粘附组装的速度是不是增强了？最好的证据就是拿图说话，外泌体增强迁移细胞粘附的组装（见Figured、e、f）。
图太多了，信息太丰富了，估计小伙们头脑已经在风暴中，不知所云了，小编再给大家来张整篇文章思路图：
主要围绕“自分泌exosome通过增强粘附组装，促进定向持续有效的细胞迁移”为中心，导航细胞转移。再也不迷糊了，一个小故事也完结了。
联系：
自分泌Exosome为什么能承载纤维连接蛋白？是存在特异的结合位点？如果是，是不是通过抑制纤维连接蛋白与Exosome结合，从而抑制细胞的转移？Exosome同时会不会以结合方式，承载其他功能蛋白，影响细胞转移以及信号传递……
标书：咱们再来看看外泌体的标书