基因敲除小鼠(Knockout mice)制备技术方法

(0)

相关推荐

  • Cre、Flp等重组酶系统的故事

    随着研究的不断深入,现代神经科学需要关注大量不同种类的神经元或胶质细胞,如多种GABA能中间神经元.小胶质细胞等.遗憾的是,这些细胞往往没有成熟的.不泄露的启动子供选择,那么在这种情况下,我们该如何实 ...

  • 基因敲入小鼠(Knockin mice)制备技术方法

    制作转基因小鼠时,外源基因是随机插入基因组的,具体插入哪个位置不一定. 基因敲入技术可以实现把外源基因准确的插入到指定位置,其原理.方法都和Knock out一样. 最开始,人们使用Knockin技术 ...

  • 基于Base editing技术的iStop基因敲除小鼠

    传统方法构建基因敲除模型小鼠是在小鼠胚胎干细胞中通过同源重组的方法敲除掉一个外显子,该方法效率低,实验周期长,且干细胞打靶需要通过囊胚注射,获得的F0代小鼠是嵌合体,需要嵌合到生殖嵴才能繁育出F1代的 ...

  • 条件性基因敲除小鼠技术实验流程

    条件性基因敲除主要通过染色体位点特异性重组酶系统实现,如Cre-loxP.Flp-FRT.Dre-Rox等,其中最常用的是Cre-loxP系统.在待敲除目的基因序列两端各插入一个loxP序列,得到Fl ...

  • 全身性基因敲除小鼠技术实验流程

    根据目的基因序列设计合成sgRNA,与Cas9 mRNA共同注射到小鼠受精卵.Cas9核酸酶.sgRNA共同结合到基因组靶序列后,切割双链DNA,通过非同源末端连接(Non-homologous en ...

  • Fgf21基因敲除小鼠模型构建技术原理

    Fgf21基因敲除小鼠背景信息 FGF家族成员具有广泛的促有丝分裂和细胞存活特性,并参与多种生物过程,包括胚胎发育.细胞生长.形态发生.组织修复.肿瘤生长和侵袭. 成纤维细胞生长因子21(FGF21) ...

  • Park2基因敲除小鼠模型构建技术原理

    Park2基因敲除小鼠模型构建技术原理

  • 基因敲除小鼠模型构建技术原理

    传统策略是通过同源重组的方式,用 Neo 基因替换或删除关键外显子来敲除基因,其周期长,费用高.TALEN,CRISPR 技术出现后,加速了基因敲除鼠的制作,而且降低了费用.CRISPR 切割 DNA ...

  • Rag1/Rag2基因敲除小鼠构建技术原理

    作为Rag1和Rag2基因敲除小鼠,皮下接种肝癌组织块和肿瘤细胞后能形成肿瘤,并且可以增长.由FACS检测小鼠外周静脉血中的T.B淋巴细胞生成量极低,与Nude小鼠T.B淋巴细胞产生量相当甚至更低,与 ...

  • B-p53基因敲除小鼠构建技术方法

    B-p53基因敲除小鼠,深入研究肿瘤相关疾病的重要工具 p53基因是迄今发现与人类肿瘤相关性最高的基因,在所有恶性肿瘤中,50%以上会出现该基因的突变.正常p53的生物功能好似"基因组卫士& ...