RNAi设计与载体构建技术流程

RNA干扰技术概述

RNA干扰（RNA interfering，RNAi）现象是由与靶基因序列同源的双链RNA引发的广泛存在于生物体内的序列特异性基因转录后的沉默过程。

由于RNAi具有高度的序列专一性，可以特异地将特定的基因沉默，从而获得基因基因功能丧失或基因表达量的降低。因此可以作为功能基因组学研究的一种强有力的工具。RNAi技术可以广泛应用到包括功能学，药物靶点筛选，细胞信号传导通路分析，疾病治疗等。

成功的RNAi实验设计是您实验成功的前提。

RNAi设计与载体构建技术流程

1、基因的mRNA序列设计3条干扰片段；

2、把干扰片段设计成茎环结构克隆到含U6启动子或其他特定启动子的载体中，测序验证无误；

3、把空载和干扰质粒分别转染细胞；

4、用western blot检测干扰效率，筛选到干扰效率最高的片段可用于后续的研究。