Crispr/Cas9腺病毒构建流程 / 开普饭

导语 2020年10 月 7 日,瑞典皇家科学院宣布,将诺贝尔化学奖授予法国埃马纽埃尔·卡彭蒂耶(Emmanuelle Charpentier)和美国詹妮弗·杜德纳(Jennifer A. Doudn ...

今天@人民网报道,@南方科技大学贺建奎宣布,一对基因编辑婴儿在中国健康诞生.此事件引起轩然大波,此举是否符合伦理,是否会引起更多问题,我们还未知晓,为了弄清到底这是一项什么技术,我找到了2014年 ...

CRISPR小鼠实验随着CRISPR在2013年的出现,一切都发生了变化(Cong et al., 2013)!Haoyi第一次接触CRISPR是在他使用这项新技术设计小鼠模型时(Wang et a ...

Cas9蛋白的CDS长达4kb,克隆难度和包毒难度都相对大,将Cas9基因高效导入细胞是应用Cas9/CRISPR系统进行基因敲除的难点之一,极大地限制可供选择的将基因导入细胞的方法.并且在用CRIS ...

Puro 抗性浓度摸索实验将细胞如下图1稀释.给药7天后,弃培养液,用台盼蓝染色2 min,显微镜下观察细胞存活情况.确定细胞多克隆细胞筛选和单克隆细胞筛选浓度. 图1 抗性浓度摸索单克隆形成验证 ...

一些实验前的说明 sgRNA验证:在实验开始前,可以通过sgRNA在线验证,筛选高效率的sgRNA用于敲除细胞系的构建. 基因拷贝数:建议在开始实验之前确定目标基因的拷贝数.许多永生化细胞系,尤其是癌 ...

① 针对特定基因序列,利用软件(sgRNA Designer)预测潜在 sgRNA 序列,并依据实验要求挑选合适的靶点: ② sgRNA 活性筛选,选出有活性且特异性高的 sgRNA: ③ 构建 sg ...

CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) /Cas (CRISPR-associated) 是最近几年出现的 ...

植物核雄性不育(GMS)突变体及其相应的GMS基因,是解析雄性发育调控机理和开发生物工程雄性不育系统的重要材料.目前,已鉴定植物GMS基因超过100个,主要分为4类:转录因子(TF).脂代谢.糖代谢和 ...

一.利用Cas9 质粒建立knock-out 细胞系实验的详细过程 1.1 确定待敲除基因的靶位点 1.2 设计识别靶位点的识别的一对DNA Oligo(引物) 1.3 构建表达sgRNA的质粒 1. ...

Crispr/Cas9腺病毒构建流程