稳转细胞系构建常见问题汇总 / 开普饭

Hepes是一种非离子俩性缓冲液,其主要成分是羟乙基哌嗪乙硫磺酸.其在PH7.2-7.4范围内具有较好的缓冲能力.Hepes的应用十分广泛,而作为生物缓冲剂时可用于细胞培养基中作为缓冲试剂,在蛋白质研 ...

病毒包装 .载体构建我们整理了以下几个常见问题. 1.什么是MOI? 在微生物学中, MOI是病原体(如噬菌体或病毒.细菌等)与感染目标(如细胞)的比率.对于病毒, MOI是病毒颗粒数量与特定空间中存 ...

慢病毒构建并包装后,以进行贴壁细胞或悬浮细胞的转染.具体流程如下: 1. 对慢病毒基因进行改造,即敲除U3端的400bp的特定基因,使其逆转录和整合的能力,但保留产生病毒颗粒必须的蛋白的能力. ...

Cas9基因的稳定整合保证了CRISPR Cas9核酸酶的表达. 实验流程: 1. 构建含Cas9 基因的慢病毒载体 2. 转染目的细胞系 3. 筛选稳定且高表达的细胞系 4. 采用基因组PCR以验证 ...

慢病毒(Lentivirus)是一种逆转录病毒,为双链RNA.不同于一般的病毒,慢病毒具有更广泛的宿主,对正在分裂的细胞和非分裂的细胞均具有感染能力.重组慢病毒载体是以HIV-1为基础,使用疱疹病毒V ...

构建载有目的基因的重组转座子载体,复苏目标细胞(以下以293T细胞为例):复苏293T细胞,接种于6孔板中,进行细胞转染:共转染时,重组转座子载体,pSB100,按比例均匀的混合,加入到等体积的转染试 ...

铸造大讲堂今天一.浇口杯在浇注系统中有什么作用? 浇口杯是漏斗形的外浇口,单独制造或直接在铸型内形成,成为直浇道顶部的扩大部分.其作用是: 承接来自浇包的金属液,防止飞溅和溢出,方便浇注: 减少金 ...

2020年11月25日,生态环境部.国家发展改革委.公安部.交通运输部和国家卫生健康委修订发布了<国家危险废物名录(2021年版)>(以下简称<名录>).针对<名录> ...

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