基因敲除技术的主要方法和步骤有哪些？ / 开普饭

遗传物质DNA记录着成千上万个基因讯息,是人体生长发育的指导手册.DNA同源重组作为三代DNA代谢途径之一,是常见的生物事件.同源重组(Homologous Recombination)是指两股具有相 ...

这是一篇针对实验室萌新写的关于CRISPR-Cas9技术的详细介绍,对于实验室老手也建议收藏转发给师弟师妹,这样省心省力,又能节省大量讲解时间,这不香么? 原核生物的"免疫系统" ...

根据目的基因序列设计合成sgRNA,将Cas9和sgRNA基因转染目的细胞,通过sgRNA引导Cas9核酸酶对目的基因位点进行切割,引起DNA双链断裂(DSB),通过细胞自身的非同源末端修复(NHEJ ...

根据基因敲入位点序列设计合成sgRNA,将Cas9.sgRNA及Donor质粒共同转染目的细胞,通过sgRNA引导Cas9核酸酶对基因敲入位点进行切割,引起DNA双链断裂(Double-strand ...

基因敲除是自80年代末发展起来的一种分子生物学技术,是通过一定的途径使机体内特定的基因发生突变或缺失的技术,通过观察基因缺失引起的表型变化,进而推测该基因的生物学功能.早期的基因敲除主要是利用DNA同 ...

LncRNA基因敲除概述长链非编码RNA(Long Noncoding RNA,LncRNA)指的是长度在200nt以上.不编码蛋白.但参与细胞内多种生物学过程的RNA分子.人类基因组计划研究发现只 ...

基因敲入概述基因敲入(Gene knock-in)是指利用随机整合.转座子系统.同源重组等方式将外源功能基因插入到基因组中,使其在细胞内进行表达的基因编辑技术.研究基因功能的手段主要有两种:一种是基 ...

基因敲入(gene knock in)是利用基因同源重组,将外源有功能基因(基因组原先不存在.或已失活的基因),转入细胞与基因组中的同源序列进行同源重组,插入到基因组中,在细胞内获得表达的技术. 基因 ...

基因敲除实验原理: CRISPR-Cas9基因敲除系统是Cas9内切酶切割双链DNA,生物体启动NHEJ修复途径,切割位点产生移码突变,导致基因沉默. NHEJ修复途径是一种错误倾向修复机制,用于在缺 ...

①.建立生物模型.在基因功能,代谢途径等研究中模型生物的建立非常重要.基因敲除技术就常常用于建立某种特定基因缺失的生物模型,从而进行相关的研究.这些模型可以是细胞,也可以是完整的动植物或微生物个体.最 ...

基因敲除技术的主要方法和步骤有哪些？