稳定细胞株构建---高产细胞株的秘密 / 开普饭

载体系统借助真核基因表达调控的理论,可将较强的顺式作用元件集中到一个载体中,使其方便高效地表达外源基因.目前,已经构建了许多真核表达载体,它们包含适当的顺式作用元件和选择标记.顺式作用元件主要有启动子 ...

p53突变(mutp53)丧失抑癌特性,驱动恶性肿瘤,但目前仍不清楚mutp53如何驱动肿瘤转移.来自清华大学生命科学学院.抗肿瘤蛋白质药物国家工程实验室罗永章教授课题组的研究人员发现,mutp53通 ...

全球新冠疫情仍在继续,在某些国家和地区甚至有愈演愈烈之势.安徽.辽宁近期也突发了一波疫情,深圳5月21日也新增了1例无症状感染者.警钟再次响起,新冠病毒从未离我们远去. 打开腾讯新闻,查看更多图片 & ...

半岛全媒体记者王媛通讯员张传琪白文兴随着我国新冠病毒疫苗上市品种的增多,疫苗安全性和有效性的关注度持续上升.目前国内上市的5种疫苗有什么不同?该如何选择?日前,青岛流亭机场海关针对公众的诸多 ...

转染-筛选-扩增-单克隆化-筛选-驯化首先,通过质粒将目的蛋白的编码基因导入到细胞内.质粒上除了目的基因外还带有抗性基因,比如抗生素抗性基因.这样在转染后就可以利用选择压力富集整合质粒的细胞.在哺乳 ...

一.试剂 1.细胞培养基及其他细胞培养所需试剂. 2.转染辅助试剂Polybrene(用水配制为6mg/ml,-20℃冻存). 3.Cas9表达慢病毒(制备方法见Cas9慢病毒包装实验). 4.嘌呤霉 ...

构建方bai法:先把质粒整合到染色体上后,用相应的质粒DNA中的抗性标志来筛选该细胞系,就行成了稳定表达的细胞株. 细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群.细胞株的特殊性质 ...

通过sgRNA引导Cas9核酸酶切割基因组目的序列导致DNA双链断裂(Double-strand breaks, DSB),同时以包含点突变的同源序列为模版,通过同源重组修复(Homology dir ...

CRISPR/Cas9系统软件广泛运用于多种多样遗传基因点突变细胞株的构建:在其中包含了单点突变和多点突变细胞遗传基因,也有比如动物细胞定点突变的步骤非常复杂,怎么才能快速搭建自身的遗传基因点突变细胞 ...

工程细胞株是工业生产和科研过程中常用的工具细胞,是指经过基因编辑达到稳定敲入.敲除.过表达或敲低特定基因和蛋白的细胞株.制备工程细胞株有多种途径,可分为病毒介导和非病毒介导两大类,但最终所编辑的基因都 ...

稳定细胞株广泛用于许多重要的应用,包括生物制品(如重组蛋白和单克隆抗体)生产.药物筛选和基因功能研究.开发稳定细胞株的过程通常始于将所需的质粒转染至选定的宿主细胞,一般是 CHO 或 HEK 293 ...

转染-筛选-扩增-单克隆化-筛选-驯化首先,通过质粒将目的蛋白的编码基因导入到细胞内.质粒上除了目的基因外还带有抗性基因,比如抗生素抗性基因.这样在转染后就可以利用选择压力富集整合质粒的细胞.在 ...

稳定细胞株构建---高产细胞株的秘密