稳转细胞株构建流程及应用领域 / 开普饭

编译:怀瑾,编辑:夏甘草.江舜尧. 原创微文,欢迎转发转载. 导读皮肤响应牵张的能力已经被充分用于重建手术.在塑造组织结构的过程中,细胞会受到机械力的作用,由细胞骨架.细胞间粘附力以及细胞外基质(E ...

近咱们技术部门的小姐姐接到好多用户朋友的询问,说"不了解正在研究的蛋白用哪个抗体合适".也有用户朋友经常询问"说明书中写着可以用于ICC/IF,那我做组织的荧光成像是可以 ...

编译:Champion,编辑:夏甘草.江舜尧. 原创微文,欢迎转发转载. 导读为了解决不同命运下HSC克隆是否在转录谱差异这一问题,本研究设计了一个内源性RNA条形码系统PolyloxExpress ...

近年来,生物药的市场需求逐年扩容,其中抗体药物因其靶向性好,治疗效果显著,在生物药中占据着举足轻重的地位,目前已经进入了抗体药物发展的黄金时代.随着抗体药的需求越来越大,抗体筛选技术的发展也是日新月异 ...

转染-筛选-扩增-单克隆化-筛选-驯化首先,通过质粒将目的蛋白的编码基因导入到细胞内.质粒上除了目的基因外还带有抗性基因,比如抗生素抗性基因.这样在转染后就可以利用选择压力富集整合质粒的细胞.在 ...

如果选择的方法不对,或者细胞株不对,不同的细胞株做基因敲除细胞系的改造会有什么变化呢?筛选细胞是基因敲除细胞成败的重要环节!如果没有正确的方法那么基因敲除的细胞株工作就不能顺利的进行,首先要知道影响基 ...

构建方bai法:先把质粒整合到染色体上后,用相应的质粒DNA中的抗性标志来筛选该细胞系,就行成了稳定表达的细胞株. 细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群.细胞株的特殊性质 ...

慢病毒(Lentivirus)是一种逆转录病毒,为双链RNA.不同于一般的病毒,慢病毒具有更广泛的宿主,对正在分裂的细胞和非分裂的细胞均具有感染能力.重组慢病毒载体是以HIV-1为基础,使用疱疹病毒V ...

LentiCRISPRv2-GOI过表达载体构建利用同源重组的方法构建LentiCRISPRv2-GOI过表达载体,采用双酶切的方式获得线性化载体,根据同源重组设计目的片段的引物.目的片段的获得分为 ...

Puro 抗性浓度摸索实验将细胞如下图1稀释.给药7天后,弃培养液,用台盼蓝染色2 min,显微镜下观察细胞存活情况.确定细胞多克隆细胞筛选和单克隆细胞筛选浓度. 图1 抗性浓度摸索单克隆形成验证 ...

细胞的稳定转染稳定转染的是将外源基因整合到细胞自身的基因组上,使外源基因成为细胞基因组的一部分而得以复制.对细胞进行稳定转染最终可筛选得到稳定细胞株,稳定细胞株在重组蛋白/抗体生产.基因编辑.功能研 ...

稳转细胞株实验原理: 在基因功能的研究中,将目的基因有效导入靶细胞,是功能研究的前提条件之一.根据不同的实验需求可以选择瞬时转染/感染和稳转细胞株构建. 瞬时转染/感染的特点:外源DNA不整合到宿主的 ...

稳转株即稳定表达细胞株,指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系.慢病毒感染-药物筛选法是目前广泛应用的稳转株构建方法,具有高效整合.目标细胞广泛等特点. 稳定转染: 转染的质粒D ...

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