稳定细胞株构建流程 / 开普饭

稳定细胞系构建最常用的方法是采用慢病毒.那是否一定要采用慢病毒呢?答案是非必须的.采用质粒瞬转也能够构建稳定细胞系.下面就和细胞君一起熟悉质粒瞬转构建稳定系: 方法应用前题:目的细胞的瞬转效率? 细胞 ...

CHO和骨髓瘤细胞是构建稳定细胞株最常用的两种宿主细胞.基本上用这两类细胞生产的治疗性蛋白都能分泌到细胞外,从而可以从细胞培养液中收获产物.CHO细胞属于成纤维细胞,是一种非分泌型细胞,它本身很少分泌 ...

稳定细胞株广泛用于许多重要的应用,包括生物制品(如重组蛋白和单克隆抗体)生产.药物筛选和基因功能研究.开发稳定细胞株的过程通常始于将所需的质粒转染至选定的宿主细胞,一般是 CHO 或 HEK 293 ...

转染-筛选-扩增-单克隆化-筛选-驯化首先,通过质粒将目的蛋白的编码基因导入到细胞内.质粒上除了目的基因外还带有抗性基因,比如抗生素抗性基因.这样在转染后就可以利用选择压力富集整合质粒的细胞.在 ...

如果选择的方法不对,或者细胞株不对,不同的细胞株做基因敲除细胞系的改造会有什么变化呢?筛选细胞是基因敲除细胞成败的重要环节!如果没有正确的方法那么基因敲除的细胞株工作就不能顺利的进行,首先要知道影响基 ...

细胞的稳定转染稳定转染的是将外源基因整合到细胞自身的基因组上,使外源基因成为细胞基因组的一部分而得以复制.对细胞进行稳定转染最终可筛选得到稳定细胞株,稳定细胞株在重组蛋白/抗体生产.基因编辑.功能研 ...

稳定转染细胞株,即稳转细胞株,该技术已广泛应用于包括基因功能研究.蛋白质工程.重组抗体制备等生命科学的各个领域.稳转细胞株的构建通常是将外源基因克隆至含有某种筛选标记的载体上,将载体转染目的细胞并整合 ...

稳定细胞系(stable cell line),是指质粒整合到染色体上后,用相应的质粒DNA中的抗性标志来筛选该细胞系,就成了稳定表达的cell line. 以下实验,构建稳定细胞株而不是瞬时转染更能 ...

化学试剂介导的转染方法和电转,整合率低,同时整合位点不稳定,易发生再次丢失的情况,而且整合位点一般都在转录活跃区之外,所以并不是理想的稳定整合工具.另外,整合后的拷贝数是由核内的外源DNA局部浓度,而 ...

稳定细胞株构建流程