筛选稳定细胞株的方法主要有哪些？ / 开普饭

稳定细胞系构建最常用的方法是采用慢病毒.那是否一定要采用慢病毒呢?答案是非必须的.采用质粒瞬转也能够构建稳定细胞系.下面就和细胞君一起熟悉质粒瞬转构建稳定系: 方法应用前题:目的细胞的瞬转效率? 细胞 ...

重组蛋白A 产品来源:蛋白A是金黄色葡萄球菌的一种膜蛋白,具有与抗体特异性结合的能力. 产品应用:蛋白A亲和层析柱已成为应用广泛的纯化抗体的亲和柱,可从腹水,血清和细胞培养上清或细胞抽提物中分离和纯化 ...

疣是由人类乳头瘤病毒引起的一种皮肤表面赘生物.多见于儿童及青年,潜伏期为1-3个月,能自身接种扩散.病毒存在于棘层细胞中,可促使细胞增生,形成疣状损害.根据临床表现和部位,分为寻常疣.扁平疣.跖疣.生 ...

甲醛检测的方法方法具体情况AHMT 分光光度法分光光度法测定的主要方法有乙酰丙酮法.铬变酸法.MBTH法.副品红法.AHMT法等几种.乙酰丙酮法乙酰丙酮法原理是利用甲醛与乙酰丙酮及氨生成黄色化合物二乙 ...

研究某个基因的功能最常用的手段是在宿主细胞中过量表达或者通过RNA干扰的方法knock-down该基因,常规手段有瞬时转染和筛选稳定细胞系. 筛选出该基因的过表达或者RNA干扰的稳定细胞系会给您的实验 ...

在使用G418.潮霉素B或嘌呤霉素筛选稳定细胞系细胞之前,需要先通过梯度实验确定适合该类细胞的最佳药物浓度.对于一些常见的细胞系,通常可以在资料中找到推荐的药物浓度.例如Hela细胞用400 μg/m ...

2.1 宿主细胞选择工业上主要使用两大类CHO 细胞:① GS野生型,含弱的GS活性(GS WT):CHO-K1(ATCC CCL-61,ECACC 85051005),CHOK1SV(lonza) ...

一.试剂 1.细胞培养基及其他细胞培养所需试剂. 2.转染辅助试剂Polybrene(用水配制为6mg/ml,-20℃冻存). 3.Cas9表达慢病毒(制备方法见Cas9慢病毒包装实验). 4.嘌呤霉 ...

展开

哺乳动物细胞是生产重组治疗蛋白的主要宿主细胞,特别是一些需要复杂的翻译后修饰的重组蛋白.由于中国仓鼠卵巢(CHO)细胞出色的翻译后修饰和工业可拓展性等使其成为最常用的用于重组蛋白工业生产的细胞系. 获 ...

CHO和骨髓瘤细胞是构建稳定细胞株最常用的两种宿主细胞.基本上用这两类细胞生产的治疗性蛋白都能分泌到细胞外,从而可以从细胞培养液中收获产物.CHO细胞属于成纤维细胞,是一种非分泌型细胞,它本身很少分泌 ...

通常使用的转染方法主要有DNA-磷酸钙共沉淀法,电击法,脂质体法. 质粒DNA的基本元件外源基因是以质粒DNA的形式进入动物细胞的,同时质粒DNA上带有提高外源基因转录和翻译水平的元件.尽管病毒来源 ...

稳定细胞系(stable cell line),是指质粒整合到染色体上后,用相应的质粒DNA中的抗性标志来筛选该细胞系,就成了稳定表达的cell line. 以下实验,构建稳定细胞株而不是瞬时转染更能 ...

筛选稳定细胞株的方法主要有哪些？