慢病毒系统建立基因敲除细胞系
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全球技术地图 创新丨前沿丨科普丨资讯 无论你混不混生物圈.玩不玩基因编辑,你的朋友圈一定被"CRISPR"刷屏过.作为这两年最炙手可热的技术,CRISPR成功登上2015年Scie ...
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【走近诺奖】“基因魔剪”——CRISPR-Cas9
创意化学 一个有情怀的社团 10月7日,诺贝尔化学奖获奖名单公布,加州大学伯克利分校的Jennifer A. Doudna教授和德国马普感染生物学研究所的Emmanuelle Charpentier因 ...
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癌症的基因疗法遇到大麻烦
癌症(含软组织肉瘤)本质上是一种基因病,细胞在分裂复制过程中,细胞核里的染色体上的基因突变,产生了异常细胞.基因突变,包括缺失.融合.扩增等异常变化. 这时,如果身体刚好丧失了两大机能,就能长出肿瘤. ...
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Nat. Chemical Biol. | 诺奖得主发表的CRISPR最新、最全的基因编辑研究综述!...
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基因敲除细胞系构建步骤
生物学家在基因敲除细胞以前都是先做遗传基因敲低,可是因为shRNA的技术性自身的限定没法得到基因功能完全缺少的体细胞,乃至常常会出現shRNA敲低了,可是体细胞WB实际效果不太好:另外Knockout ...
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【干货】基因敲除细胞系的敲除策略
如果选择的方法不对,或者细胞不对 将不可避免的要全部基因敲除细胞的工作推翻重来,下面我们来看看影响基因敲除细胞系的要点有哪些吧?搞清楚具体的流程和步骤,轻松搞定基因敲除细胞系. 一,做基因敲除的细胞 ...
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基因敲除细胞系快速高效的构建方法
一.CRISPR/Cas9系统的工作原理 CRISPR系统是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御机制,其中以二类CRISPR系统即CRISPR/Cas9最为经典常用.此系统的工作原理是 ...
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【干货】基因敲除细胞系技术介绍
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基因敲除细胞系(株)构建技术原理及优点
CRISPR/Cas9(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是新出现的一种由sgRNA指导Cas核酸内切酶对靶向基因进行 ...
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【干货】基因敲除细胞系制备流程
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基因敲除细胞系介绍及应用案例
通过病毒法,化学转染法或电转法将gRNA和Cas9转入细胞中,根据转染方法不同进行不同时长的药筛,药筛完成后挑选单克隆培养.选择不同的克隆分别进行靶位点扩增及测序验证,筛选出移码基因敲除的阳性克隆. ...
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THP-1基因敲除细胞系 ——免疫与炎症研究的利器
THP-1细胞系是从一名患有急性单核细胞白血病的1岁小男孩的外周血中分离得到的[1],自1980年建系以来,THP-1细胞被广泛用于单核细胞和巨噬细胞相关的机制.信号通路以及营养和药物运输等研究中.相 ...
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CRISPR/Cas9基因敲除细胞系技术流程
基因敲除细胞或动物模型一直以来是开展基因功能研究.寻找合适药物作用靶点的重要工具.CRISPR/Cas系统是细菌的一种适应性免疫机制,用来抵抗各种外来核酸的入侵. CRISPR/Cas9技术与ZFN. ...