全身性基因敲除技术应用
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全身性基因敲除小鼠技术实验流程
根据目的基因序列设计合成sgRNA,与Cas9 mRNA共同注射到小鼠受精卵.Cas9核酸酶.sgRNA共同结合到基因组靶序列后,切割双链DNA,通过非同源末端连接(Non-homologous en ...
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CRISPR-Cas9基因敲除技术原理
这是一篇针对实验室萌新写的关于CRISPR-Cas9技术的详细介绍,对于实验室老手也建议收藏转发给师弟师妹,这样省心省力,又能节省大量讲解时间,这不香么? 原核生物的"免疫系统" ...
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基因敲除技术实验流程
根据目的基因序列设计合成sgRNA,将Cas9和sgRNA基因转染目的细胞,通过sgRNA引导Cas9核酸酶对目的基因位点进行切割,引起DNA双链断裂(DSB),通过细胞自身的非同源末端修复(NHEJ ...
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基因敲入技术实验流程
根据基因敲入位点序列设计合成sgRNA,将Cas9.sgRNA及Donor质粒共同转染目的细胞,通过sgRNA引导Cas9核酸酶对基因敲入位点进行切割,引起DNA双链断裂(Double-strand ...
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基因敲除技术的基本原理
基因敲除是自80年代末发展起来的一种分子生物学技术,是通过一定的途径使机体内特定的基因发生突变或缺失的技术,通过观察基因缺失引起的表型变化,进而推测该基因的生物学功能.早期的基因敲除主要是利用DNA同 ...
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LncRNA基因敲除技术原理
LncRNA基因敲除概述 长链非编码RNA(Long Noncoding RNA,LncRNA)指的是长度在200nt以上.不编码蛋白.但参与细胞内多种生物学过程的RNA分子.人类基因组计划研究发现只 ...
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基因敲入技术原理
基因敲入概述 基因敲入(Gene knock-in)是指利用随机整合.转座子系统.同源重组等方式将外源功能基因插入到基因组中,使其在细胞内进行表达的基因编辑技术.研究基因功能的手段主要有两种:一种是基 ...
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基因敲入技术实验原理及流程
基因敲入(gene knock in)是利用基因同源重组,将外源有功能基因(基因组原先不存在.或已失活的基因),转入细胞与基因组中的同源序列进行同源重组,插入到基因组中,在细胞内获得表达的技术. 基因 ...
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基因敲除技术实验原理及流程
基因敲除实验原理: CRISPR-Cas9基因敲除系统是Cas9内切酶切割双链DNA,生物体启动NHEJ修复途径,切割位点产生移码突变,导致基因沉默. NHEJ修复途径是一种错误倾向修复机制,用于在缺 ...