基因敲除细菌技术介绍
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PNAS|超越CRISPR,RLR新基因编辑工具问世
哈佛大学怀斯生物工程研究所研究人员发明了一种新的基因编辑工具,称为反转子文库重组工程(Retron Library Recombineering,RLR)(反转子(retron)是由逆转录酶(RT)和 ...
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CRISPR/Cas9 实验流程
一.利用Cas9 质粒建立knock-out 细胞系实验的详细过程 1.1 确定待敲除基因的靶位点 1.2 设计识别靶位点的识别的一对DNA Oligo(引物) 1.3 构建表达sgRNA的质粒 1. ...
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中国学者发现的迷你版CRISPR-Cas基因编辑系统,有何精巧之处?
9.3 知识分子 The Intellectual CRISPR-Cas系统是当前基因编辑领域应用最为广泛的生物技术| 图源:pixabay.com 撰文|计永胜 编辑|陈晓雪 ● ...
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真菌基因敲除技术介绍
真菌,复数真菌,是真菌界约144,000种已知生物中的任何一种,包括酵母,铁锈,黑穗病,霉菌和蘑菇.真菌的种类很多,包括粘菌和卵菌(水菌),它们不属于真菌界,但通常被称为真菌. Chromista王国 ...
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CRISPR-Cas9基因敲除技术原理
这是一篇针对实验室萌新写的关于CRISPR-Cas9技术的详细介绍,对于实验室老手也建议收藏转发给师弟师妹,这样省心省力,又能节省大量讲解时间,这不香么? 原核生物的"免疫系统" ...
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基因敲除技术实验流程
根据目的基因序列设计合成sgRNA,将Cas9和sgRNA基因转染目的细胞,通过sgRNA引导Cas9核酸酶对目的基因位点进行切割,引起DNA双链断裂(DSB),通过细胞自身的非同源末端修复(NHEJ ...
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基因敲入技术实验流程
根据基因敲入位点序列设计合成sgRNA,将Cas9.sgRNA及Donor质粒共同转染目的细胞,通过sgRNA引导Cas9核酸酶对基因敲入位点进行切割,引起DNA双链断裂(Double-strand ...
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基因敲除技术的基本原理
基因敲除是自80年代末发展起来的一种分子生物学技术,是通过一定的途径使机体内特定的基因发生突变或缺失的技术,通过观察基因缺失引起的表型变化,进而推测该基因的生物学功能.早期的基因敲除主要是利用DNA同 ...
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LncRNA基因敲除技术原理
LncRNA基因敲除概述 长链非编码RNA(Long Noncoding RNA,LncRNA)指的是长度在200nt以上.不编码蛋白.但参与细胞内多种生物学过程的RNA分子.人类基因组计划研究发现只 ...
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基因敲入技术原理
基因敲入概述 基因敲入(Gene knock-in)是指利用随机整合.转座子系统.同源重组等方式将外源功能基因插入到基因组中,使其在细胞内进行表达的基因编辑技术.研究基因功能的手段主要有两种:一种是基 ...
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基因敲入技术实验原理及流程
基因敲入(gene knock in)是利用基因同源重组,将外源有功能基因(基因组原先不存在.或已失活的基因),转入细胞与基因组中的同源序列进行同源重组,插入到基因组中,在细胞内获得表达的技术. 基因 ...
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基因敲除技术实验原理及流程
基因敲除实验原理: CRISPR-Cas9基因敲除系统是Cas9内切酶切割双链DNA,生物体启动NHEJ修复途径,切割位点产生移码突变,导致基因沉默. NHEJ修复途径是一种错误倾向修复机制,用于在缺 ...