GITR人源化小鼠模型介绍
品系背景:C57BL/6N
品系构建策略:
在小鼠GITR基因位点敲入人源GITR胞外域序列,保留小鼠胞内域,由小鼠GITR内源启动子驱动,构建嵌合型GITR人源化小鼠模型。
品系说明:
hGITR在小鼠体内具有正常的生理表达和调节模式。
GITR胞外域人源化,利于hGITR靶向药物的识别。
保留小鼠GITR胞内域,保证正常的胞内信号转导。
小鼠靶基因不表达,避免交叉反应。
小鼠的免疫系统功能健全。
研究应用:
本模型可用于评估hGITR靶向药物在免疫健全小鼠体内的有效性及安全性。
模型验证:
GITR表达检测
图1. hGITR在免疫细胞上被诱导表达。
使用αCD3/αCD28抗体刺激脾细胞后(2d),流式细胞术检测到hGITR在hGITR小鼠的Treg(CD4+ Foxp3+)、传统CD4+ T细胞(CD3+CD4+)、CD8+ T细胞(CD3+CD8+)和B细胞(CD3- CD19 +)细胞上都有表达。
图2. hGITR在肿瘤浸润细胞中(TILs)被诱导表达。
从接种MB49膀胱癌细胞的hGITR小鼠体内分离脾细胞和TILs,hGITR在Treg(CD4+ Foxp3+)、传统CD4+ T细胞(CD3+CD4+)、CD8+ T细胞(CD3+CD8+)细胞上都有表达。
GITR功能检测
图3. hGITR对Teff和Treg具有功效。
Treg(CD4+Foxp3+)经小鼠或人源GITRL刺激或不刺激2h后,与CFSE标记的传统CD4+ T细胞(CD4+CD25-)共培养,并用αCD3抗体 +/- 人源GITRL激活。
体内药效实验
图4. hGITR单抗具有抗肿瘤作用。
野生型小鼠和hGITR小鼠分别接种MB49膀胱癌细胞,αhGITR抗体处理能抑制hGITR小鼠体内肿瘤生长。
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