GITR人源化小鼠模型介绍

品系背景：C57BL/6N

品系构建策略：

在小鼠GITR基因位点敲入人源GITR胞外域序列，保留小鼠胞内域，由小鼠GITR内源启动子驱动，构建嵌合型GITR人源化小鼠模型。

品系说明：

• hGITR在小鼠体内具有正常的生理表达和调节模式。

• GITR胞外域人源化，利于hGITR靶向药物的识别。

• 保留小鼠GITR胞内域，保证正常的胞内信号转导。

• 小鼠靶基因不表达，避免交叉反应。

• 小鼠的免疫系统功能健全。

研究应用：

本模型可用于评估hGITR靶向药物在免疫健全小鼠体内的有效性及安全性。

模型验证：

• GITR表达检测

图1. hGITR在免疫细胞上被诱导表达。

使用αCD3/αCD28抗体刺激脾细胞后（2d），流式细胞术检测到hGITR在hGITR小鼠的Treg（CD4+ Foxp3+）、传统CD4+ T细胞（CD3+CD4+）、CD8+ T细胞（CD3+CD8+）和B细胞（CD3- CD19 +）细胞上都有表达。

图2. hGITR在肿瘤浸润细胞中（TILs）被诱导表达。

从接种MB49膀胱癌细胞的hGITR小鼠体内分离脾细胞和TILs，hGITR在Treg（CD4+ Foxp3+）、传统CD4+ T细胞（CD3+CD4+）、CD8+ T细胞（CD3+CD8+）细胞上都有表达。

• GITR功能检测

图3. hGITR对Teff和Treg具有功效。

Treg（CD4+Foxp3+）经小鼠或人源GITRL刺激或不刺激2h后，与CFSE标记的传统CD4+ T细胞（CD4+CD25-）共培养，并用αCD3抗体 +/- 人源GITRL激活。

• 体内药效实验

图4. hGITR单抗具有抗肿瘤作用。

野生型小鼠和hGITR小鼠分别接种MB49膀胱癌细胞，αhGITR抗体处理能抑制hGITR小鼠体内肿瘤生长。